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中文名称:CF568 膜联蛋白V偶联物
英文名称: CF568 Annexin V; CF568-Annexin V;Annexin V-CF568
激发波长:约 578 nm
发射波长:603 nm
纯 度 :95%+
商家:西安强化生物
保存条件:-20 ℃ 避光保存
简要描述
CF568 Annexin V是一种高性能的荧光标记探针,用于检测细胞在早期凋亡过程中外翻到细胞膜外的磷脂酰丝氨酸。
1)核心成分
Annexin V: 一种钙离子依赖的磷脂结合蛋白,对磷脂酰丝氨酸具有高度的亲和力。
CF568: 一种明亮的橘红色荧光染料,激发/发射波长约为 558/583 nm。
展开剩余81%2)工作原理: 在健康细胞中,PS主要分布在细胞膜的内侧。当细胞发生凋亡时,PS会从细胞膜的内侧翻转到外侧,从而暴露在细胞外环境中。在钙离子存在的情况下,CF®568 Annexin V能够与暴露在外的PS特异性结合,通过流式细胞仪或荧光显微镜观察到橘红色的荧光信号,从而指示凋亡细胞。
试剂优点
高亮度与光稳定性: CF568染料比许多传统的Texas Red或R-PE类似物更亮,且光稳定性更好,能提供更清晰、更持久的信号,尤其适合荧光显微成像。
pH不敏感性: 其荧光强度在较宽的pH范围内保持稳定,减少了因细胞微环境pH变化导致的信号波动,使结果更可靠。
与FITC和PI兼容: CF®568的发射光谱(橘红色)与FITC(绿色)和碘化丙啶(红色荧光,但通常使用另一个通道检测)能很好地分离开,非常适合进行多色荧光分析。
适用于多种平台: 可用于流式细胞术、荧光显微成像以及高通量筛选分析。
即用型试剂: 通常以优化好的结合缓冲液形式提供,方便使用,减少了实验步骤的优化时间。
应用领域
细胞凋亡检测: 是检测和定量早期凋亡细胞的“金标准”方法。
药物筛选与药理学研究: 评估抗癌药物、化疗药物或其他化合物对细胞凋亡的诱导或抑制作用。
肿瘤生物学研究: 研究肿瘤细胞的死亡机制以及治疗反应。
免疫学研究: 分析免疫细胞的活化与死亡,如T细胞、B细胞的克隆清除。
神经生物学研究: 研究神经退行性疾病中的神经元细胞死亡。
发育生物学: 观察胚胎发育过程中的程序性细胞死亡。
实验流程
1)细胞准备与处理
收集经过实验处理(如药物处理、辐射等)的细胞和未处理的对照细胞。
用预冷的PBS轻轻重悬细胞并离心(例如1500 rpm,5分钟),弃去上清。重复洗涤一次。
用预冷的PBS或结合缓冲液将细胞重悬,并调整细胞密度至 ~0.5-1 x 10⁶ cells/mL。
2)染色
取100 μL细胞悬液(约1-5 x 10⁵个细胞)加入流式管中。
向每个管中加入 5 μL的CF®568 Annexin V。
轻柔涡旋混匀,于室温(20-25°C)下避光孵育 15分钟。
注意:孵育时间和温度应按照产品说明书进行优化,但15分钟室温是常见条件。
3)上机前准备
孵育结束后,向每个管中加入400 μL的预冷Annexin V结合缓冲液,稀释样品。
可选但强烈推荐: 在稀释后、上机前,立即向管中加入 5-10 μL的PI溶液。
尽快在1小时内用流式细胞仪进行分析。
4)流式细胞仪分析
使用 488 nm 的激光器激发。
CF568的荧光信号通常使用 PE或PI通道(约575 nm波段) 进行检测。
PI的荧光信号使用 FITC通道旁边的PI专用通道或PerCP-Cy5.5通道(约670 nm波段) 进行检测,具体取决于仪器配置。
相关试剂
Biotin cadaverine;生物素尸胺
C6-NBD-CERAMIDE;86701-10-2
DY430-X tyramide;DY430-X-酪胺
BC Maleimide;BC Mal;BC马来酰亚胺
BG Maleimide:BG Mal;BG马来酰亚胺
Activated R-Phycoerythrin;活化R-藻红蛋白
BC Succinimidyl Ester;BC SE;BG琥珀酰亚胺酯
BG Succinimidyl Ester;BG SE;BG琥珀酰亚胺酯
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